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(재미있는)분자생물학 그림여행 : lab = BioMedical research / 2nd ed

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도서 상세정보
자료유형 :	단행본
ISBN :	899579061X
분류기호 :	572.8
개인저자 :	유욱준
서명/저자사항 :	(재미있는)분자생물학 그림여행= BioMedical research: lab/ 유욱준,; 신인철 지음.
판사항 :	2nd ed.
발행사항 :	대전: 분자방, 2006.
형태사항 :	381 p.: 삽화; 28 cm.
개인저자 :	신인철
분류기호 :	572.8
언어	한국어

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KMO201000127 권 호 :
발행년 : 2006
발행처 : 분자방

서 명 : (재미있는)분자생물학 그림여행=BioMedical research:lab

목차
1장. PCR을 이용한 사람 유전자의 돌연변이 규명 = 15
1. PCR을 위한 시료 준비 = 20
1.1 혈액으로부터의 Genomic DNA 분리
1.2 Kit을 이용해서 쉽게 DNA를 얻는 방법
2. Polymerase Chain Reaction = 24
3. Subcloning of PCR Products = 28
2장. RT-PCR : Reverse Transcription-PCR = 33
1. RNA 분리과정 = 34
2. cDNA 합성 : Reverse Transcription = 34
3. PCR Amplification = 35
3장. Real Time PCR 방법을 이용한 mRNA 정량 = 37
1. cDNA 만들기 = 38
2. PCR Reaction Mix = 38
3. Real Time PCR 과정 = 41
4. 결과 분석 = 42
4장. PCR의 응용 = 43
1. Pathogen의 검출 = 43
2. Human Genetics(인체 유전학) = 43
3. Evolutionary Biology(진화 생물학) = 44
4. Genetic Fingerprinting = 44
5장. DNA Preparation from E. coli = 45
1. Competent Cell 만들기 = 45
2. Transfection과 Single Strand DNA 분리 = 46
2.1 Transfection
2.2 Single Strand DNA 분리
3. Transformation과 Plasmid DNA 분리 = 55
3.1 Transformation
3.2 Alkaline Lysis 방법에 의한 Plasmid DNA 분리
6장. DNA Sequencing = 61
1. Sequenase를 이용한 DNA sequencing = 63
1.1 Annealing
1.2 Labeling Reaction
1.3 Termination Reaction
2. PCR Product의 Direct Sequencing = 69
2.1 PCR 산물의 전처리
2.2 Sequencing Reaction
3. Sequencing Gel 준비 = 71
3.1 Gel 유리판 준비
3.2 Gel Solution 준비(6% Polyacrylamide, Denaturing Gel)
3.3 Gel 붓기
4. Sequencing Gel Electrophoresis = 74
5. Sequencing Service Center : Automatic Capillary Type Instruments = 78
5.1 BigDye Terminator Reaction
5.2 Cyclic Sequencing Reaction
5.3 Precipitation-Resuspension
5.4 Capillary Electrophoresis
5.5 Sequencing 결과에 영향을 미치는 요인
7장. Southern Hybridization = 83
1. 혈액으로부터 Genomic DNA의 분리 = 84
2. Southern Hybridization을 이용한 DNA 분석 = 87
2.1 Restriction Enzyme Digestion
2.2 Agarose Gel Electrophoresis : Blotting할 Gel
2.3 Processing the Gel
2.4 Denatured DNA를 NC Filter로 옮기기
2.5 Hybridization
2.6 Washing
2.7 Signal Generation／Detection
8장. Northern Hybridization = 99
1. Total RNA Isolation from Tissue = 101
1.1 Guanidinium Method에 의한 Total RNA 분리
1.2 Single-Step RNA Isolation
2. Northern Blotting = 106
2.1 Glyoxal／DMSO를 이용한 Denaturing Gel Electrophoresis
2.2 Formaldehyde를 이용한 RNA의 Denaturing Gel Electrophoresis
2.3 Denatured RNA를 NC Filter로 옮기기
2.4 Hybridization
9장. Probe 만들기 = 115
1. Random Primer Extension 방법 = 116
1.1 Annealing
1.2 Polymerization
1.3 Spun-Column Chromatography
2. T4 Polynucleotide Kinase를 이용한 DNA의 5' 말단 Labeling = 118
2.1 Dephosphorylation
2.2 Kination
3. Nick Translation = 121
4. Single Strand DNA Probe 만들기 = 123
4.1 Annealing
4.2 Labeling Reaction
4.3 Probe의 분리
4.4 Electroelution
10장. 단백질 생산 = 131
1. 소 혈액으로부터 단백질(Thrombin) 정제 = 132
2. E. coli로부터 Pfu Polymerase 발현 및 정제 = 138
3. In vitro Transcription and Translation(Wheat Germ Extract System) = 144
3.1 RNA 합성(in vitro Transcription)
3.2 RNA 정제
3.3 단백질 합성(in vitro Translation)
11장. Polyclonal Antibody의 제조 = 149
1. Immunization of Rabbit = 149
1.1 깨끗하게 정제된 Antigen의 경우
1.2 정제가 덜 된 Antigen의 경우
2. Serum Test = 150
3. Bleeding = 151
3.1 심장 채혈 방법(Heart Puncture)
3.2 귀로부터 채혈하는 방법
12장. Western Blotting = 153
1. SDS Polyacrylamide Gel 만들기 = 154
2. Sample 준비 = 156
3. Gel Electrophoresis = 157
4. Electrotransfer = 159
13장. ELISA(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay) Detection of Antibodies = 163
14장. Ouchterlony Double-Diffusion Test = 167
15장. 단일클론 항체 만들기 = 169
1. Immunization of Mice = 169
2. Preparation of Myeloma cells = 170
3. Preparation of Mouse Feeder Cell = 171
4. Fusion = 173
5. Cloning of Hybridoma Cell Lines by Limited Dilution = 178
6. Freezing and Recovery of Hybridoma Cell Lines = 179
6.1 Freezing
6.2 Recovery
7. Production of Ascites Fluids = 182
16장. Site-Directed Mutagenesis = 185
1. U-template를 응용한 고효율 Mutagenesis = 186
1.1 U-template의 제작
1.2 Synthesis of Mutagenic Strand
2. PCR을 응용한 Mutagenesis = 192
2.1 Dpnl Digestion을 이용한 Mutagenesis
2.2 Overlap Extension을 이용한 Mutagenesis
17장. cDNA Library Screening = 199
1. Preparation of Plating Bacteria = 200
2. Titer = 200
3. Plating = 202
4. Immobilizaton of λ DNA on Nitrocellulose (NC) Filter = 203
5. Hybridization = 204
6. Washing = 205
7. Picking up an Isolated Plaque = 206
8. 2차 Screening = 207
9. Purification of λ Phage DNA = 207
18장. Animal Cell Culture and Tronsfection = 213
1. Animal cell culture 방법 = 214
1.1 동결세포의 해동(Thawing)
1.2 Subculture
1.3 세포의 동결보존(Freezing)
1.4 Transfection(Calcium, Liposome, Electroporation)
19장. FACS를 이용한 Cell Cycle 분석 = 227
1 Cell 준비 = 228
1.1 배지에 떠다니며 자라는 세포 또는 혈액 샘플의 경우
1.2 바닥에 붙어서 자라는 세포의 경우
2. Propidium Iodide로 염색하는 방법 = 229
2.1 세포 고정
2.2 염색(Propidium Iodide)
2.3 FACS로 측정
3. DAPI로 염색하는 방법 = 232
3.1 세포 고정
3.2 염색(DAPI)
3.3 FACS로 측정
4. Hoechst 33342로 살아있는 세포를 염색하는 방법 = 234
4.1 세포 준비
4.2 염색(Hoechst 33342)
4.3 FACS로 측정
5. DNA의 양과 Cyclin의 발현량을 동시에 분석 = 235
5.1 세포 고정
5.2 Anti-cyclin Primary Antibody를 붙이는 과정
5.3 FITC-conjugated Secondary Antibody를 붙이는 과정
5.4 염색(Propidium Iodide)
5.5 FACS로 측정
20장. RNase Protection Asscy(RPA) = 241
1. Total RNA Isolation = 242
2. Probe 만들기와 정제하기 = 245
3. Procedure(RNase Protection Assay) = 245
21장. C. elegans(예쁜 꼬마 선충)를 이용한 유전자의 in vivo 기능 연구 = 249
1. Competent Cell(E. coli HT115) 만들기 = 250
2. dsRNA 생성 Vector에 Cloning하기 = 250
3. C. elegans에서 RNAi하기 = 251
4. Antibody Staining = 253
5. 결과 분석 = 258
22장. In situ Hybridization 초파리 배아에서 유전자 mRNA 검색 = 261
1. RNA Probe 만들기 = 262
2. 초파리 배아(Embryo) 모으기 = 265
3. In situ Hybridization전 배아의 사전처리 = 269
4. Hybridization = 272
5. Detection = 274
23장. 형질전환 초파리 Library 검색하기 = 277
1. Human 단백질 Sequence의 확보 = 278
24장. Yeast : 유전자 적중 Library를 이용한 HCS 약물 작용점 탐색 및 Synthetic Lethality를 통한 Genetic Pathway 규명 = 289
1. 서론 : 약물작용점 탐색 방법 = 289
2. 효모를 이용한 in vivo Cell-based 약물작용점 탐색 방법 = 290
3. 분열효모와 출아효모 = 292
4. 분열효모의 Haploinsufficiency를 이용한 in vivo Cell-based 약물작용점 탐색 시스템 = 293
4.1 유전자 적중 분열효모 균주의 제조
4.2 유전자 적중 균주의 데이터베이스
4.3 세포성장민감성(Growth Fitness)을 이용한 약물작용점 탐색 : 화합물의 약물 작용점
4.4 Microarray를 이용한 약물작용점 탐색 : 천연물의 약물작용점
5. Synthetic Lethality를 통한 Genetic Pathway의 규명 = 298
5.1 효모를 이용한 Synthetic Lethality의 개요
5.2 Genome Wide 유전자 적중 효모를 이용한 Synthetic Lethality
6. Genome Wide 유전자 적중 분열효모 100% 활용하기 = 300
6.1 약물작용점 탐색분야
6.2 Synthetic Lethality
6.3 개별 유전자 기능연구
7. 맺음말 = 303
25장. Confocal Microscopy = 305
1. LSCM의 개발과 원리 = 306
2. Confocal Microscope의 활용 = 307
3. Confocal Microscope 사용시 고려할 사항 = 309
26장. 박편제작(薄片製作, Microtomy) = 313
1. 파라핀 박편제작 = 314
2. 플라스틱 박편제작 = 317
3. 냉동 박편제작(Cryostat Section) = 321
27장. 형질전환 생쥐 = 325
1. Preparation of DNA for Microinjection = 325
2. Microinjection of Foreign DNA = 331
3. 생쥐 수정란의 이식 = 335
28장. Gene Targeting = 339
1. Preparation of Mouse Embryonic Fibroblasts(MEF) = 339
2. Preparation of Feeder Layer = 343
3. Maintenance of Embryonic Stem(ES) Cells = 344
4. Electroporation of ES Cells = 347
5. Production of Chimeras Derived from ES Cells = 348
29장. 인간 배아줄기세포(Human Embryonic Stem Cells) = 351
1. 인간 배아줄기세포의 확립 = 352
1.1 Mechanical Isolation 방법
1.2 Immunosurgery 방법
2. 인간 배아줄기세포의 유지 = 353
2.1 Feeder Cells의 증식
2.2 Feeder Layer의 준비
2.3 인간 배아줄기세포의 계대배양
2.4 인간 배아줄기세포의 동결보존
2.5 인간 배아줄기세포의 융해
3. Human Embryoid Body의 제작 = 362
4. 인간 배아줄기세포의 특성분석 = 365
4.1 Alkaline Phosphatase Staining
4.2 SSEA-1, 3, & 4에 대한 Immunocytochemistry
4.3 Oct-3／4에 대한 Immunocytochemistry
4.4 Teratoma Formation
30장. Bioinformatics-컴퓨터를 이용한 생물학 = 371
1. SRS에 대하여 = 372
1.1 SRS란 무엇인가?
1.2 SRS의 전체 구성
2. SRS를 이용한 CDK2 유전자 연구 = 375
2.1 사람 CDK2 유전자 검색
2.2 여러 종의 CDK2 유전자 서열 비교
2.3 사람 CDK 유전자들의 서열 비교
2.4 기타 SRS에 대하여